Salute e malattia
Un emocromo richiede più del semplice conteggio di globuli rossi, bianchi e piastrine: implica anche l'identificazione dei singoli globuli bianchi e l'osservazione della morfologia di globuli rossi e piastrine. Sebbene il conteggio effettivo possa essere fatto su uno strumento elettronico, identificazione e morfologia si fanno ponendo una goccia di sangue su un vetrino e facendo uno striscio. Lo striscio viene essiccato e colorato con colorazione di Wright, ed esaminato al microscopio.
Pulire la punta dell'indice con alcol o acqua e sapone. Fare una piccola puntura alla punta usando lancetta sterile o ago sterile. Deporre una piccola goccia di sangue a un'estremità del vetrino. Avvicinare il bordo di un altro vetrino alla goccia a 30-40° e spingere la goccia lungo il vetrino originale per fare uno striscio sottile o "film". Lasciare asciugare lo striscio.
Immergere il vetrino con striscio essiccato nel piatto con colorante di Wright per 15 secondi. Scuotere l'eccesso e trasferire nel piatto con acqua distillata per 30 secondi. Sciacquare sotto acqua corrente per rimuovere eccesso di colorante. Tamponare fondo e bordi su carta assorbente e lasciare asciugare all'aria.
Mettere una goccia di olio d'immersione sullo striscio colorato essiccato. Posizionare il vetrino sullo stage del microscopio e fissarlo tra le clip. Accendere la lampada e regolare sia il condensatore (su = più luminoso/meno contrasto, giù = più scuro/più contrasto) che il diaframma irideo (aperto = più luce, chiuso = meno luce). Iniziare l'esame con l'obiettivo a bassa potenza a immersione (40, 43 o 45x).
Ruotare l'obiettivo a bassa potenza e abbassarlo con le manopole di messa a fuoco grossolana finché tocca appena la goccia d'olio. Abbassare nell'olio con la manopola fine. Guardare nell'oculare e mettere a fuoco lentamente, usando solo la manopola fine. I globuli rossi appaiono come piccoli dischi bi-concavi rossastri (molti). I globuli bianchi sono più grandi, meno numerosi, sparsi tra i rossi. Hanno generalmente un grande nucleo viola circondato da citoplasma blu, rosa o grigio-blu a seconda del tipo. Principali tipi: neutrofili, linfociti, monociti, eosinofili, basofili. Le piastrine appaiono come piccoli puntini viola sparsi.
Dopo messa a fuoco iniziale e scansione con obiettivo bassa potenza, ruotare con attenzione l'obiettivo ad alta potenza nell'olio. Questo fornisce il massimo ingrandimento (95, 97 o 100x) per esaminare da vicino corpi inclusi, microrganismi, anomalie strutturali. Solo lievi aggiustamenti di messa a fuoco con manopola fine. Potrebbe servire regolare la sorgente luminosa: alzare condensatore e aprire diaframma per immagine più luminosa.
Dopo l'esame, ruotare l'obiettivo a bassa potenza in posizione, rimuovere il vetrino, pulire tutte le tracce d'olio da obiettivi e stage.
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