Enzimi di restrizione: funzione biologica, applicazioni in biotecnologia e mappatura del DNA

Protezione batterica dai virus

Gli enzimi di restrizione (endonucleasi) "limitano" l'infezione virale riconoscendo e tagliando il DNA estraneo in sequenze specifiche prima che replichi. Il virus inietta il suo genoma nel batterio, dirottando la macchina replicativa; l'enzima taglia il DNA virale, salvando la cellula.

Ingegneria genetica: inserimento geni estranei

Le endonucleasi di restrizione permettono di inserire segmenti di DNA in vettori/plasmidi, rendendoli parte del genoma ospite. Esempio classico: inserimento gene insulina umana in E. coli per produzione ricombinante.

Mappatura per restrizione (Restriction Mapping)

Technica per determinare l'ordine dei siti di restrizione su un plasmide (DNA extracromosomico batterico). Passaggi:

1. Digestione del plasmide con diversi enzimi (singoli e combinati).
2. Elettroforesi su gel per separare i frammenti per dimensione.
3. Ricostruzione della mappa fisica del plasmide.

Utile per clonaggio, verifica costrutti, epidemiologia molecolare.