Cariotipo: Identificazione e Analisi dei Cromosomi

Il cariotipo mostra numero e struttura dei cromosomi. Ogni cromosoma = due filamenti DNA identici, uniti al centromero. Umani: 23 coppie. Ogni coppia distinguibile per: dimensioni, posizione centromero, reazione a coloranti/sonde colorate. Analisi esperta del cariotipo rivela: perdita, duplicazione, traslocazione su cromosoma sbagliato.

Struttura del Cromosoma

Morfologia definita da: dimensioni totali + posizione centromero (pizzica cromosoma in due bracci). Braccio corto = "p" (petite), lungo = "q". Classificazione per posizione centromero:

• Metacentrico: centromero centrale → bracci p e q simili.
• Sottometacentrico: centromero decentrato.
• Acrocentrico: centromero vicinissimo a un'estremità.

Convenzione: in cariotipo, braccio p sempre in alto. Numerazione: 1 (più grande) → 22 (più piccolo), eccetto cromosomi sessuali: X (femmina) e Y (maschio). X ~cromosoma 7; Y ~cromosoma 22.

Esempi identificazione facile: Cromosoma 1 = più grande, metacentrico; 2 = leggermente minore, sottometacentrico; 19-20 = piccoli, metacentrici; 21-22 = ancora più piccoli, acrocentrici.

Banding G (Giemsa)

Metodo tradizionale. Giemsa = colorante che scurisce regioni ricche basi adenina/timina (AT), schiarisce regioni ricche guanina/citosina (GC). Pattern bande chiare/scure alternate (G-bande) unico per ogni coppia. Es: Y = p chiaro, metà q superiore chiara, metà q inferiore scura; 19 = due bande sottili scure sopra/sotto centromero. La maggior parte pattern G complessi → serve esperto (ore) per verificare integrità e corretta disposizione DNA.

Altri Metodi

• FISH (ibridazione in situ fluorescente): sonde DNA colorate che legano specificamente un cromosoma. Semplifica identificazione, risoluzione > Giemsa.
• Cariotipo spettrale (SKY): ogni cromosoma lega set unico sonde fluorescenti colorate. Miscelazione diverse quantità = "dipinge" ogni cromosoma colore unico. Con chiave cromatica → chiunque identifica velocemente 23 coppie.